Метод определения магнитизация эритроцитов, метод гель-фильтрации с использованием моноклональных антител. Автоматические анализаторы QWALYS (Diagast), IH-1000 (Bio-Rad).

Исследуемый материал Цельная кровь (с ЭДТА)

Доступен выезд на дом

Тест предназначен для определения резус-принадлежности потенциальных реципиентов (обследование перед госпитализацией) и беременных или планирующих беременность женщин.

Резус (Rh) - одна из важнейших систем эритроцитарных антигенов (наряду с системой АВ0), клинически значимая не только для безопасного переливания крови, но и при ведении беременности (при оценке возможности возникновения резус-конфликта и риска развития гемолитической болезни плода и новорожденного).

Антиген RhD является наиболее иммуногенным* из антигенов системы резус, его наличие на поверхности эритроцитов обуславливает положительную резус-принадлежность. Наличие этого структурного белка мембраны эритроцитов является генетически наследуемым признаком. В составе антигена RhD выделяют структурные единицы – эпитопы (в настоящий момент определены 36 структурных единиц).

Резус-отрицательные пациенты развивают иммунный ответ, сопровождаемый выработкой антирезусных антител, при переливании им резус-положительной крови. Наличие анти-резус антител ведет к разрушению эритроцитов, несущих резус-антиген, и к тяжелым пост-гемотрансфузионным реакциям при повторных переливаниях резус-положительной крови резус-отрицательным реципиентам.

Аналогичный иммунный ответ может развивать резус-отрицательная женщина при беременности резус-положительным плодом. Несмотря на то, что обычно при беременности кровь плода не смешивается с кровью матери, в некоторых ситуациях (не первая по счету беременность, патологические состояния, связанные с изменением проницаемости плаценты, сенсибилизация после предшествующего переливания резус-положительной крови) иммунная система матери вырабатывает антитела к антигенам эритроцитов плода. Антитела разрушают резус-положительные эритроциты, что приводит к различным клиническим проявлениям (ранней потере плода, хроническому невынашиванию беременности) и к гемолитической болезни плода и новорожденных**.

У беременных женщин, имеющих резус-положительную принадлежность, проблем совместимости по резус-фактору с ребенком не возникает.

*Иммуногенность ‒ потенциальная способность антигена вызывать иммунный ответ (образование антител) у лиц, не имеющих этого антигена.

**Гемолитическая болезнь плода и новорожденных ‒ патологическое состояние плода или новорожденного, сопровождаемое гемолитической желтухой, анемией, нарушением рефлексов. Обусловлено иммунологическим конфликтом между матерью и плодом из-за несовместимости по эритроцитарным антигенам и связано с разрушением эритроцитов плода под действием антиэритроцитарных антител, поступающих через плаценту из крови матери в кровь ребенка. В большинстве случаев гемолитическая болезнь новорожденных обусловлена конфликтом по D-антигену. Но следует учесть, что возникновение данной патологии может быть обусловлено реакциями по АВ0-антигенам, а также несовместимостью по другим антигенам системы резус (С, Е, с, d, e) или М-, N-, Kell-, Duffy-, Kidd-антигенам (см. тест №15RH Rh (C, E, c, e), Kell – фенотипирование).

Оценка резус-принадлежности при беременности или подготовке к беременности, а также контроль наличия аллоиммунных антиэритроцитарных антител, включая антитела к RhD-антигену (см. тест № 140 Аллоиммунные антитела), важны для правильного ведения беременности резус-отрицательных женщин. Риск развития гемолитической болезни плода и новорожденного при повторных беременностях можно предотвратить своевременным введением Rh-иммуноглобулина.

Наследование резус-фактора

Генотип индивида состоит из двух гаплотипов, полученных по наследству: один от отца, другой от матери. Каждый гаплотип может обуславливать наличие антигенной детерминаты (D) или ее отсутствие (d). Доминантным является наличие антигенной детерминанты, следовательно:

Таким образом, у родителей с положительной резус-принадлежностью могут рождаться дети с отрицательной резус-принадлежностью:

В случае когда резус-принадлежность будущего ребенка требует определения, необходимо использовать генеалогический или генетический метод (см. тест №7207 Определение генотипа резус-фактора).

Проблемы в определении резус-принадлежности

Большая часть резус-положительных лиц экспрессируют достаточное количество антигенных детерминант, содержащих все эпитопы. В этом случае при определении резус-принадлежности, вне зависимости от используемых тест-систем, проблем не возникает, и резус-принадлежность четко определяется как положительная. Однако у ряда лиц (не более 1% в европейской популяции) при определении резус-принадлежности могут возникать сложности по следующим причинам:

1. Количество антигенных детерминант снижено в 3-10 раз, но структурно они не изменены. Такой вариант антигена называется слабым, D weak. Степень снижения количества детерминант разная, поэтому реакция агглютинации у таких пациентов может проходить с разной степенью выраженности.
2. Количество антигенных детерминант может быть обычным, но они структурно изменены. На детерминантах антигена D отсутствуют некоторые эпитопы (одновременно может отсутствовать до 5 эпитопов). Такой вариант антигена называется неполным, вариантным или частичным, D partial. У человека выявлено более 10 таких форм антигена D. Наиболее часто встречаемым является вариант антигена DVI (встречаемость не более 0,1% в европейской популяции).
3. Вариант резус-антигена D el характерен для азиатской популяции, встречаемость составляет до 30%. Проявляется очень низкой экспрессией антигена D на поверхности эритроцитов. Чаще всего обычными методами определяется как резус-отрицательный. С клинической точки зрения эти варианты важно отличать, особенно у женщин детородного возраста и при планировании переливания крови. При «неполном» варианте (D partial) возможно формирование антител к «полному» D антигену при переливании резус-положительной крови или гемокомпонентов. При «слабом» варианте (D weak) образование резус-антител маловероятно. Подход к выполнению исследования и к интерпретации результатов резус-принадлежности потенциальных реципиентов и потенциальных доноров отличается.

Обратите внимание, что лаборатория ИНВИТРО исследует биоматериал только потенциальных реципиентов. Обследование потенциальных и действующих доноров требует применения принципиально других тест-систем и производится только на станциях переливания крови.

Литература

1. Минеева П.В. Группы крови человека. Основы иммуногематологии. - СПб. 2004:188.
2. Оловникова Н.И., Николаева Т.Л., Митерев Г. Ю. Иммуногематологическое обследование больных перед трансфузией донорских эритроцитов: пути оптимизации и улучшения качества тестирования. Справочник заведующего КДЛ. - М: Изд. МЦФЭР. 2014;6:33-46.
3. Rizzo C. et al. Weak D and partial D: our experience in daily activity. Blood Transfusion. 2012;10:235-236.
4. Westhoff С.М. The Structure and Function of the Rh antigen Complex. Seminars in Hematology. 2007;44(1):42-50.

Для неинвазивного определения резус-фактора плода используется периферическая венозная кровь беременной женщины, из которой выделяется циркулирующая в ней плодная ДНК, которая анализируется на наличие последовательности ДНК экзонов 7 и 10 гена RHD , кодирующего выработку антигена D. Исследование проводится методом ПЦР в режиме реального времени.

Как известно, концентрация ДНК плода в кровотоке беременной становится достаточной для проведения анализа, начиная с 10 недель беременности (по УЗИ). Важно отметить, что данный способ исследования ДНК плода является неинвазивным, не несет угрозы течению беременности, т.е. абсолютно безопасен как для женщины, так и для плода. Точность используемой методики составляет 96-100% и зависит от количества плодной ДНК в кровотоке беременной.

С биологической точки зрения именно RHD определяет резус-принадлежность крови человека. Обычно для резус-отрицательных людей характерно полное отсутствие гена RHD . В таких случаях результаты генотипирования совпадают с результатами обычного серологического способа определения резус-фактора крови. Однако примерно у 1% людей с серологически резус-отрицательной кровью ген RHD может присутствовать, что, как правило, связано с наличием мутации в RHD , и приводит к отсутствию или неполной экспрессии (работы) гена. В таких случаях результаты генотипирования показывают резус-положительный вариант крови, а серологически выявляется отрицательный либо слабоположительный резус-фактор. Для таких пациенток определить резус-фактор плода невозможно. Однако наблюдение за течением беременности нужно проводить по схеме ведения резус-отрицательных женщин с учетом возможности развития резус-конфликта. В любом случае после родов рекомендуется уточнить резус-фактор ребёнка серологическим методом.

В случае выявления последовательности ДНК гена RHD в крови беременной женщины с резус-отрицательной группой крови делается вывод о положительном резус-факторе плода. В таких ситуациях вероятность развития резус-конфликта и гемолитической болезни реально существует, поэтому женщине и врачам необходимо принимать все меры предосторожности в отношении развития данного грозного осложнения беременности. В целом, положительный результат теста говорит о необходимости строгого динамического контроля за уровнем соответствующих антител в крови беременной и своевременного введения антирезусного иммуноглобулина для предотвращения развития гемолитической болезни плода/новорожденного. Однако вопрос о введении препарата должен решаться только акушером-гинекологом на основании, в том числе, и других методов обследования беременной. При отсутствии антител к Rh-фактору по результатам серологического метода (ИФА) и генетически положительном резус-факторе плода, женщине рекомендуется введедние антирезусного иммуноглобулина на сроке от 28 недель беременности (для профилактики гемолитической болени новорожденного) и не позднее 72 часов после родоразрешения (для профилактики резус-конфликта при следующей беременности).

В случае отсутствия ДНК гена RHD в крови беременной делается вывод о высокой вероятности резус-отрицательной крови плода (однако для подтверждения результата рекомендуется повторить тест на более поздних сроках, но не позднее 27 недель беременности). В такой ситуации вероятность развития резус-конфликта между материнским организмом и плодом практически отсутствует, что говорит об отсутствии необходимости постоянного определения титра анти-D-антител и введения антирезусного иммуноглобулина беременной. А также в случае необходимости проведения инвазивной диагностики плода не увеличивает риски развития гемолитической болезни.

Стоит отметить, что данный анализ актуален только для тех супружеских пар, в которых реально существует угроза развития резус-конфликта при беременности, т.е. женщина обладает резус-отрицательной кровью, а мужчина – резус-положительной. При этом мужчина должен быть гетерозиготен по наличию делеции гена RHD . Только в этом случае у супружеской пары возникает 50%-ная вероятность закладки эмбриона с резус-отрицательной группой крови. Генотип мужчины можно определить, предварительно проведя ему генетический анализ определения генотипа по гену RhD (тест №2008.4).

Купить Получить консультацию

Показания Подготовка Как оказывается услуга Интерпретация результатов

• Ведение беременности у женщины с резус-отрицательной кровью для своевременного расчета риска развития резус-конфликта.
• При отсутствии в крови резус-отрицательной беременной антирезусных антител на сроке 20 недель следует провести данное исследование для принятия решения о необходимости профилактического введения женщине антирезусного иммуноглобулина.
• Необходимость хирургического прерывания беременности у резус-отрицательной женщины с целью прогнозирования развития резус-конфликта при следующей беременности.

*ВНИМАНИЕ! Анализ имеет смысл проводить тем женщинам, мужья которых обладают резус-положительной кровью и при этом являются гетерозиготными носителями делеции в гене RHD .

Забор крови осуществляется в процедурном кабинете центра Genetico; биоматериал в пробирке с CPDA доставляется в лабораторию, где из венозной крови беременной выделяется фракция ДНК плода, которая анализируется на наличие в ней участков, характерных для гена RHD .

Для выполнения данного исследования беременной женщине нужно сдать кровь (8-10мл) из периферической вены в пробирку с консервантом CPDA.

При использовании этого типа пробирок допускается транспортировка при комнатной температуре (от +18°С до +25°С) в течение 2 суток.

Допустим прием пищи накануне сбора биоматериала. Рекомендуется начать анализ в течение первых двух часов с момента сдачи крови.

При оформлении данной услуги желательно предоставить результаты генотипирования мужчины (будущего отца ребёнка) по гену RHD .

Кроме того, следует иметь с собой результаты предыдущего УЗИ плода (это нужно для уточнения срока беременности на момент исследования).

В результате предоставляется информация об определенном молекулярно-генетически резус-факторе плода. Делается заключение о вероятности развития резус-конфликта.

В некоторых случаях в результате исследования делается вывод о невозможности установления генетического резус-фактора плода. Такое происходит при генетически резус-положительной крови женщины на фоне полученных для нее ранее серологически резус-отрицательных результатов (см. описание теста).

Кроме того, в минимальном проценте случаев может быть получен сомнительный результат. Тогда пациентку просят повторно предоставить кровь для исследования.

С помощью изучения ДНК наша современная лаборатория может абсолютно точно определить резус-фактор плода. ДНК тест представляет собой исследование ДНК ребенка, которое выделяется из крови матери. Соответственно данный ДНК анализ является неинвазивным и полностью безопасным. Для установления резус-фактора плода во время беременности будущая мама должна пройти стандартную процедуру сдачи крови. Мы определяем резус-фактор, начиная с 9-й недели, что дает возможность принять меры в случае выявления резус-конфликта.

Обращаясь в «Ralzo», Вы напрямую обращаетесь в ДНК лабораторию Москвы и получаете следующие преимущества:

• Консультация опытного специалиста лаборатории в области ДНК тестов;
• Ваши образцы ДНК попадают сразу в лабораторию, что существенно увеличивает надежность и скорость анализа;
• Вы получаете стоимость анализа ДНК на отцовство по лабораторным ценам, минуя посредников.

Зачем нужен ДНК тест на определение резус-фактора плода

Данный тест ДНК является самым точным (99,9% и более). Разница в резус-факторах у мамы и малыша может, с большой вероятностью, привести к резус-конфликту, что может вызвать следующие осложнения:

• Может вызвать гемолитическую болезнь у новорожденного;
• Может вызвать выкидыш;
• Может вызвать досрочные (преждевременные) роды;
• Может вызвать нарушения развития нервной системы и органов плода.

При резус-конфликте мать может чувствовать себя прекрасно и не догадываться о болезни плода. Поэтому ДНК тест на установление резус-фактора плода рекомендуется делать всем женщинам на ранних сроках беременности.

Получить набор бесплатно Сдать в центре приема образцов ДНК

Как сдать тест на определение резус фактора ребенка

Для теста ДНК нужны образцы. Для выделения ДНК образцов плода используется кровь матери из вены.

Специалист собирает кровь матери из вены и помещает в пробирку, содержащую вещество, способствующее несвертываемости крови. Далее плазма крови отделяется от красных кровяных телец благодаря методу центрифугирования. Отделенная плазма крови перемещается в отдельную пробирку, содержащую ЭДТА. Именно плазма крови содержит ДНК ребенка. Из полученной сыворотки выделяется ДНК, которая затем исследуется специалистами.

Где сдать образцы ДНК для определения резус-фактора плода

Варианты сдачи образцов ДНК на определение пола плода:

• В пункте для приема образцов нашей лаборатории в любое подходящее для Вас время. Но для удобства, Вы можете забронировать конкретную дату и время, воспользовавшись предварительной записью.
• Самостоятельно: воспользовавшись ватными палочками, приобретенными в ближайшей аптеке (можно использовать стандартные ушные ватные палочки).
• Самостоятельно: с помощью бесплатного набора Ralzo, специально разработанного для самостоятельного забора ДНК образцов.
• С помощью бесплатного заказа курьера.

Получить бесплатную консультацию специалиста Москвы

Как оплатить неинвазивное определние пола плода и получить результаты

Для удобства у нас существуют разные способы оплаты ДНК теста:

• За наличный расчет и по банковской карте в центре по приему образцов нашей лаборатории.
• С помощью on-line оплаты на сайте нашего ДНК центра.
• В ближайшем для Вас отделении Сбербанка или другого банка по квитанции.
• При передаче образцов нашему курьеру.

Для удобства у нас существуют разные способы получения результатов ДНК тестирования:

• На электронную почту, указанную при оформлении заявки на исследование.
• При личном обращении в центре по приему образцов нашей лаборатории.
• Доставка курьером до двери.

Каждой заявке соответствует уникальный 16-ти значный номер.
Это номер, который будет известен только лаборатории и заказчику.
Данные находятся на закрытых локальных серверах, что дает абсолютную сохранность всех данных.

Стоимость определение резус-фактора плода

11 900 5 190 р.

Заказать тест

Установление резус-фактора плода в Москве

Согласно статистике, 15% беременных женщин имеют другой (отличный от плода) резус-фактор. Даже если у мамы и папы резус положительный, у ребенка может быть резус отрицательный. Ребенок может унаследовать его от других родственников по линии отца или матери, или даже от самих родителей. Из-за того что ген с положительным резусом доминантен по отношению к резус-отрицательному гену, у родителей будет положительный резус-фактор (Rr+), в то время как ребенок может взять от каждого родителя по r- гену и иметь уже отрицательный резус-фактор (rr-). Соответственно может начаться резус-конфликт.

У нас есть огромный опыт и полное понимание методов и способов проведения ДНК тестов, особенностей проведения полимеразной цепной реакции. При консультации со специалистами лаборатории, Вы можете быть уверены, что для Вашей индивидуальной ситуации будет подобран наилучший вариант ДНК теста. Вам не придется переплачивать лишние деньги или собирать образцы ДНК от дополнительных участников, в тех случаях, когда это не нужно.

Анализ крови на резус-фактор плода по крови матери, как и другие диагностические мероприятия, сегодня стал частью общепринятой акушерской практики во многих странах. Раньше для выполнения такого анализа генетический образец плода получали с помощью инвазивных методов (амниоцентез).

Инвазивные методы диагностики предназначены беременным женщинам, чьи дети имеют высокий риск получения генетических заболеваний. К ним относятся фетальные хромосомные анеуплоидии и моногенные нарушения с относительно высокой распространенностью в соответствующих популяциях.

Резус

Внимание! Стоит отметить, что для хромосомных анеуплоидий, главным образом, синдрома Дауна (СД), расчет риска основан на материнском возрасте, ультрасонографических данных и биохимических маркерах материнской сыворотки.

Что такое анализ на резус-фактор плода?

Неинвазивная методика с использованием материнской периферической крови как источника генетического материала является целью ранней пренатальной диагностики. В противоположность распространенному мнению, что плацента образует непроницаемый барьер между матерью и плодом, есть доказательство двунаправленного движения между плодом и матерью во время беременности.

Многочисленные исследования показывают, что интактные эмбриональные клетки и бесклеточные нуклеиновые кислоты плода (БНК) пересекают плаценту и могут быть найдены в материнском кровообращении. Интактно-эмбриональные клетки представляют собой привлекательную мишень для неинвазивной пренатальной диагностики (НПД) хронических аномалий у зародыша.

Изоляция и анализ клеток плода из материнской крови были широко исследованы, и разработано несколько методов для обогащения плодных клеток. Однако результаты оказались разочаровывающими из-за нехватки интактных клеток в кровообращении у матерей (1 клетка на 1 мл материнской крови) и низкой эффективности методов обогащения. Кроме того, хромосомный анализ методом флуоресцентной гибридизации затруднен из-за аномально плотных апоптотических ядер эмбриональных клеток.

Интактные плодные клетки

В 1997 году ученые сообщили о наличии бесклеточной фетальной ДНК (бфДНК) в материнской плазме и сыворотке в значительных количествах. После этого открытия была создана новая отрасль исследований в пренатальной диагностике.

Как определяют половую принадлежность ребенка по крови мамы?

Определение половой принадлежности основывается на обнаружении специфических Y-хромосомных мишеней в материнской плазме. Положительный результат свидетельствует о беременности ребенком мужского пола, а отрицательный – женского. Такие исследования проводят в специальных лабораториях в условиях инвитро.

Большинство исследований нехирургического определения пола использует ПЦР в режиме realtime для обнаружения SRY и DYS14 последовательностей в материнской плазме. Точность оценки пола плода подтверждена многими исследовательскими группами более чем на 95%, поэтому применение данного диагностического метода было принято в клинической практике.

Важно! Ранняя неинвазивная идентификация может ограничивать количество инвазивных диагностических процедур, необходимых для каждого конкретного заболевания.

Определение половой принадлежности важно и в тех случаях, когда развитие гениталий неоднозначно, и в семьях с историей состояний, связанных с появлением неоднозначных внешних половых органов и сомнительными результатами эмбрионального УЗИ.

Техника нехирургической идентификации пола была также предложена для терапии некоторых эндокринных расстройств, таких как врожденная гиперплазия надпочечников, при которой маскулинизация женского плода может быть подавлена ​​материнским введением дексаметазона с 6 недели беременности. Такой подход может позволить сократить число пострадавших от этих болезней.

Анализ на определение резус-фактора плода по крови матери

Несоответствие системы резус D (RhD) между беременной женщиной с отрицательным показателем и ее плодом может вести к алоиммунизации матери и гемолитической болезни плода (ГБП). Чаще такое происходит при последующих беременностях, когда плод RhD-позитивный. Регулярная послеродовая инъекция иммуноглобина всем беременным женщинам, страдающим RhD, предотвращает появление ГБП и успешно внедрена в различных государствах.

Гемолитическое заболевание

Определение резус-фактора плода по крови может быть достигнуто путем ПЦР-амплификации последовательностей RhD в амниотической жидкости или образцах хорионической ворсинки. Однако эти инвазивные процедуры несут не только риск выкидыша, но, главное, анализ беременных женщин с негативным риском может привести к иммунизации из-за кровотечения.

Появление НПД с применением бфДНК для определения присутствия резус-фактора у не родившегося плода дает значительный потенциал для изменения способа диагностики беременных женщин. Ген, кодирующих Rh, обычно полностью отсутствует в геноме RhD-отрицательных матерей, обнаружение таких последовательностей в материнской крови подразумевает, что плод должен быть RhD-положительным.

Есть несколько сообщений о высокой степени точности для неинвазивного определения наличия резуса-фактора плода в пренатальном периоде по крови матери, но на сегодняшний день клиническое применение существенно ограничено в развивающихся странах.

Преимущества массового определения Rh-плода путем анализа бфДНК в плазме молодой матери могли бы уменьшить использование иммуноглобулинов. Женщины, несущие Rh-негативный плод (приблизительно 40% из всей популяции), будут избавлены от ненужного воздействия антител с его дискомфортом и риском заражения вирусом (гепатит С) или прионной болезнью.

ПЦР

Технология QF-PCR считается оптимальным методом для надежного обнаружения Rh- последовательностей с использованием бфДНК. Были также предприняты усилия по неинвазивной внутриутробной диагностике состояния RhD плода с помощью масс-спектрометрии. Некоторые ученые использовали автоматизированную систему для извлечения бесклеточной ДНК из плазмы женщины в положении и обнаружили присутствие эктонов RhD.

Анализ на резус-фактор плода по крови матери: где сделать?

Данный анализ на выявление резус-фактора при развитии плода, как упоминалось выше, выполняется по крови матери. Сдавать его необходимо в лабораториях, специализирующихся на ПЦР-диагностике (например, в Хеликсе). Биоматериал берут из вены в локтевом сгибе. Анализ на наличествование резус-фактора по крови матери у плода выполняют с помощью специальной методики – «ПЦР в режиме реального времени». Он сможет быстро определить все генетические последовательности и выявить наличие RhD.

Совет! Сделать анализ можно по назначению лечащего врача или самостоятельно. Нижняя граница срока получения результатов не превышает 14 рабочих дней. Своевременное выявление несовместимости крови может спасти жизнь народившемуся малышу при должном терапевтическом вмешательстве.

Для того чтобы пройти исследование, не нужно иметь разрешение врача. Установление резус-фактора плода не имеет особых условий и показаний. Анализ является самым доступным на сегодняшний день и проводится по желанию женщины. Определяют резус-фактор по крови из вены матери. Для определения резус-фактора плода нужно:

• Позвоните нам по телефону или заполните форму «».
• Получите бесплатную консультацию специалиста и запишитесь на прием.
• Сдайте кровь.
• Получите результат в течение 3-5 рабочих дней.

БЕЗОПАСЕН ЛИ АНАЛИЗ РЕЗУС-ФАКТОРА ПЛОДА ПО КРОВИ МАТЕРИ?

Для прохождения анализа на резус-фактор плода Вам нужно только сдать кровь. Это простая и безболезненная процедура, как обычный анализ крови. Кровь помещается в специальную пробирку. Далее специалисты-генетики выделяют ДНК плода из крови матери и устанавливают резус-фактор.

В результате Вы получаете точное заключение о резус-факторе будущего малыша и сможете принять необходимые меры для предотвращения негативных последствий вовремя!

Лаборатория провела свыше 15 000 тестов на установление резус-фактора плода. Специалисты-генетики имеют ученые степени и большой опыт в проведении данного теста на резус-фактор плода.